• 构成和维持细胞膜（帮助细胞抵抗温度变化以及保护并隔离神经纤维）
• 合成性激素（黄体酮、睾丸素、雌激素、皮质醇）
• 产生胆汁酸盐，帮助消化食物
• 有阳光照射的情况下，在皮肤中转变成为维生素D。

合成胆固醇需要一系列复杂的生化反应，其原料是乙酰CoA，它是一种广泛存在的2碳分子化合物：乙酰CoA（C2）→甲羟戊酸（C6）→异戊烯焦磷酸酯（C5）→角鲨烯（C30）→胆固醇（C27）。合成胆固醇的主要部位是肝脏（每天大约1000毫克），但小肠内层细胞和其余一些细胞也可合成少量胆固醇。

人体大部分的胆固醇是在肝脏合成的。